ms培养基配制注意事项 ms培养基
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1,是把其中的微量元素减少到原来的1/2叫1/2MS培养基;
2,1/3MS培养基就是原来的微量元素减少到1/3;
例如:通常就是用母液减半,比如要配1L的1/2MS,就先配500mlMS,再加500ml水。
3,MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了。
4,MS培养液配方单
mg/L工作液浓度 单位
大量元素:
NH4NO3 1650
KNO3 1900
CaCl2·2H2O 440
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 170
微量元素:
KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
铁盐:
FeSO4·7H2O(27.8)
Na2-EDTA·2H2O(37.3)
有机物质:肌醇100
烟酸0.5
盐酸吡哆醇(维生素B6) 0.5
盐酸硫胺素(维生素B1) 0.1
甘氨酸2.0
注意:肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液,因为它比较难溶,一般配成100倍,大量元素可以配成1000倍的。
5,注意事项
(1)母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。
(2)母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5.5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。
(4)组织培养是否能够获得成功,主要取决于对培养基的选择。不同的培养基具有不同的特点,也就适合于不同的植物种类和接种材料。在开展组织培养项目时,首先要对各种培养基进行了解和分析,以便能从中选择合适的使用。组培用的培养基一般包括基础培养基和激素,但是植物激素的种类和数量,随着不同培养阶段和不同材料有变化,因此各培养基配方中均不列入植物激素。常用的基础培养基除了有MS培养基,还有B5培养基,N6培养基。
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